
相关文章
RELATED ARTICLES2025-07-11
2025-06-11
2025-06-06
2025-06-05
2026-05-19
2025-12-27
2025-04-07
2026-01-30
2025-06-24
2025-11-22
详细介绍
低密度脂蛋白(Low Density Lipoprotein,简称为LDL)是通过脂蛋白酯酶的水解作用,脱去极低密度脂蛋白(VLDL)中的甘油三脂,释放游离脂肪酸转化而来的。因甘油三酯的去除使得胆-固醇所占比例提高,增加颗粒本身密度,从而得到LDL。LDL与脊椎细胞表面的受体特异性结合,然后通过受体介导的内吞作用将胆-固醇运输到全身各处细胞。因此,LDL可以用来研究受体介导的内吞作用过程,尤其是在动脉粥样硬化等疾病中,血浆来源的LDL还可用于研究LDL在功能和代谢中的氧化作用。
红色荧光标记人源低密度脂蛋白(Human DiI-LDL)是标记荧光探针Dil(1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'- tetramethyl-indocarbocyanine perchlorate)的LDL,可以用来观察培养细胞的LDL结合位点,或筛选LDL受体表达缺陷型细胞突变株。也可以通过流式细胞术评估细胞受体水平,或检测组织内的受体水平。 DiI-LDL是研究细胞内吞作用非常好的标记物。
浓度:0.8-3.0mg/ml
性状:乳状液体
缓冲液组分:PBS(含EDTA),pH7.2-7.4
保存:2-8℃避光,效期6周,避免冻存
操作流程
1 工作液制备:无菌条件下,将DiI-LDL用细胞培养基稀释至20-40 µg/ml。
2 细胞准备:吸除培养板内培养基,向活细胞内加入上述LDL,37℃培养4-5小时。
3 孵育结束,吸去含有Human DiI-Ox-LDL的培养基,并用无探针的培养基洗几次。
4 根据实验需求用荧光显微镜或流式细胞仪检测。
a荧光显微镜观察
采用标准的罗丹明激发:发射滤光片(或建议使用波长为:Ex/Em=549nm/565nm);若需要请使用含3%甲醛的PBS进行固定,切勿使用甲醇或丙酮固定,因Dil易溶于有机溶剂。注:需设阳性细胞做对照。
b)细胞分选(流式细胞术)
胰-蛋白酶处理细胞或者加入EDTA制成单细胞悬液,选用合适的已标记纯化细胞用作阴性和阳性对照,从而进行流式分选设门(gate)。(建议使用波长为Ex: 488/514/549nm; Em: 565nm)。
注意:
Human DiI-LDL稀释后的工作液不稳定,建议现配现用,避免冻存。
为了您的健康,请佩戴一次性手套。
本产品仅限科研用途。
产品咨询