乙酰化低密度脂蛋白是一种经过化学修饰的低密度脂蛋白(LDL),在生物医学研究中具有重要的应用价值。其制备与存放要求严格,以确保其活性和稳定性。
原材料准备:
选择健康人源血浆LDL作为起始材料,确保无Hepatitis C、HIV-I和HIV-II等病毒污染。
使用大分子化合物(如聚乙二醇)除去LDL和高密度脂蛋白(HDL)以外的血清脂蛋白。
金属离子沉淀:
采用金属离子(如铜离子)沉淀LDL,通过调节pH值和离子强度优化沉淀条件。
缓冲液溶解:
使用特定缓冲液(如含有EDTA的PBS,pH 7.4)溶解沉淀,并去除未反应的金属离子。
乙酰化修饰:
将LDL载脂蛋白上的赖氨酸残基进行乙酰化修饰,阻止其与LDL受体结合,但增强其与清道夫受体的结合能力。
无菌包装:
制备完成后,进行无菌过滤和分装,确保产品无菌且可直接用于细胞培养或体内实验。
乙酰化低密度脂蛋白存放要求:
温度控制:
低密度脂蛋白应存放在4°C的无菌环境中,避免冻存,因为冻存会导致蛋白质变性和活性丧失。
避光保存:
存放时应避免强光直射,以防止光敏反应导致的蛋白质降解。
稳定性监测:
定期检查产品的稳定性,包括外观、浓度和生物活性,确保其在有效期内保持良好状态。
使用期限:
根据生产商提供的信息,低密度脂蛋白通常在4°C下可稳定保存数周至数月,具体期限需参考产品说明书。