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详细介绍
红色荧光标记人源乙酰化低密度脂蛋白产品简介:
LDL是由极低密度脂蛋白(VLDL)转变而来,主要功能是把Cholesterol运输到全身各处细胞,运输到肝脏合成胆酸,其可用于研究受体介导的内吞作用过程,尤其是在动脉粥样硬化等疾病中,其血浆来源的LDL可用于研究LDL在功能和代谢中的氧化作用。
乙酰化的LDL是修饰LDL中的一类,LDL含有未修饰的载脂蛋白,可以用来研究正常Cholesterol的转运和内吞作用。当LDL载脂蛋白的赖氨酸残基被乙酰化修饰后,LDL复合物不再与LDL受体结合,但是,修饰型LDL更容易与内皮细胞和小胶质神经细胞的“scavenger"受体结合。因此,Ac-LDL可用来研究上述细胞的功能。
人源乙酰化低密度脂蛋白(Human Acetylated Low Density Lipoprotein, Human Ac-LDL),来自健康人源血浆LDL,Hepatitis C,HIV-I和HIV-II抗体检测均为阴性。
本品为红色荧光标记人源乙酰化低密度脂蛋白(Human DiI-Ac-LDL),是标记荧光探针DiI(1,1-dioctadecyl-3,3,3,3- tetramethyl-indocarbocyanine perchlorate)的Ac-LDL。当DiI-Ac-LDL标记细胞后,在溶酶体酶的作用下,脂蛋白被降解,而DiI在细胞内膜聚集,从而可以用来检测修饰型LDL的吸收情况。可以用来标记血管内皮细胞、巨噬细胞和内皮祖细胞(EPC),可用来鉴定并分选这些细胞,以及用来研究不同细胞系对修饰化LDL的内吞作用。我司提供的DiI-Ac-LDL,每个批次均经过牛大动脉内皮细胞和小鼠巨噬细胞的标记检测来评估产品的标记特异性,从而保证结果的一致性。
产品属性:
纯度:>98%
浓度:0.8-3.0 mg/ml 此款产品为2.5mg/ml(Protein)
外观:乳状液体
缓冲液组分:0.02 mM EDTA in PBS, pH 7.4
运输与保存方法:冰袋运输。4℃保存,建议避光,6周稳定。千万不可冻存
实验步骤:
1. 在生长培养基中将DiI-Ac-LDL稀释至20-50ug/ml;
2. 将其加入到细胞中37 ºC温育4小时;
3. 去掉培养基;
4. 用无探针的缓冲液冲洗;
5. 通过荧光显微镜观察并/或者将细胞通过Trypsin(或者EDTA)进行分类;
6. 荧光显微镜:用标准罗丹明激发进行观察 (或者建议用波长激发:549nm、发射:565nm)。如果需要,用3%甲醛在PBS中固定。切勿使用甲醇或丙酮进行固定,因为DiI溶于有机溶剂。
注意事项:
1本品的稀释工作液极不稳定,建议即配即用;
2长期贮存可能会有沉淀析出,属于正常现象,低速离心2 min去除沉淀即可使用;
3为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
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